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大腸桿菌發酵與收集的實驗步驟

發布時間:2014-9-12 11:34:42??????點擊:

 1、種子接種:將凍干管或甘油管種子接種到LB培養基搖瓶中進行活化,一般可以加抗性標記對應的抗生素。然后搖床恒溫培養。

 2、發酵培養基準備:搖瓶的話好說,滅菌鍋就行。發酵罐的話,要先將罐子清洗干凈,然后配料,然后滅菌。

 3、將培養好的種子液,按一定的接種量接到發酵培養基中。如果是搖瓶發酵的話一般不用中控,時間到了放瓶即可。如果是發酵罐發酵的話,中間過程需要補料、調節PH值、控制好溶氧轉速等等。要注意取樣時樣液的密封性,如果樣液到處亂撒,容易導致噬菌體污染。

 4、不論是產酶、蛋白、氨基酸還是別的什么,產物量都是必須檢測的哦。

 5、放罐后,也要注意料液的收集、使用和滅活,嚴防噬菌體污染。

 6、發酵好的大腸桿菌通過離心機高速分離20分鐘,離心內腔溫度控制在4℃,去掉上清液,然后收集大腸桿菌,再進行冷凍干燥。


  收集大腸桿菌的關鍵儀器是選用離心的機器,上海盧湘儀離心機推薦選用GL-21M落地式高速冷凍離心機,配500ml*6的鋁合金角轉子,也可以選用GL-12M大容量冷凍離心機配1000ml*6的鋁合金角轉子。

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